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· ELISA, Western Blotting, Cytométrie de flux, Biacore
RD-Biotech met à disposition son expertise pour le développement ou la réalisation en série de méthodes d’immuno-dosages grâce à sa plate forme d’immuno-analyse.
- Développement de méthodes analytiques à partir du cahier des charges du client
- Analyse des échantillons du client à partir d’une méthode validée par le client.
Pour des applications variées :
- Diagnostic in vitro animal et humain
- Contrôles qualité
- Recherche
- Etudes cliniques
- ELISA – Développement de méthodes
RD-Biotech peut prendre en charge le développement d’une méthode ELISA, basée sur le cahier des charges du client.
RD-Biotech réalise dans un premier temps une étude de faisabilité qui va permettre de déterminer la faisabilité de la méthode ELISA : choix des anticorps et matières premières, mise au point et optimisation des différentes étapes (exemple coating des microplaques, révélation, …), choix de la stratégie :
- TEST 1 : Test en simple sandwich indirect : puits coatés par la protéine purifiée ou un extrait la contenant, révélation avec un anticorps polyclonal commercial ou obtenu par immunisation d'un lapin, révélation par un conjugué anti-espèce couplé à la péroxydase.
- TEST 2 : Test par immunocompétition : puits coatés par l'anticorps spécifique, incubation d'un mélange de protéine marquée par la péroxydase, avec la protéine purifiée non marquée.
- TEST 3 : Test en double sandwich indirect ou direct (selon les disponibilités en anticorps spécifiques) : coating par l'anticorps 1, incubation par la protéine purifiée ou non, incubation par le deuxième anticorps, révélation de l'activité péroxydase en direct (si l'anticorps 2 est conjugué) ou indirect avec un anticorps anti-espèce.
Différents paramètres sont étudiés dans ces différentes stratégies, afin d’optimiser les conditions de coating des micro-puits, d’incubation des échantillons, de révélation…
Traitement des données : Toutes les mesures d'absorbances sont enregistrées sous forme de fichiers BPL et Excel afin de pouvoir être analysées. Les données sont consignées dans un cahier paillasse, qui sera remis au client sur sa demande.
A l’issue de cette première étape, RD-Biotech est en mesure de préciser la meilleure méthodologie à utiliser, en précisant les conditions de fonctionnement les plus prometteuses du test. Dans le rapport, RD-Biotech fournit un ensemble de courbes de dosage réalisées dans des conditions variées (volume prise d'essai, nombre et durée d'incubation, conjugué enzymatique) ainsi qu'un protocole transférable décrivant l'ensemble des protocoles d'utilisation.
Le client peut alors décider de lancer l’étape de développement d’une méthode ELISA robuste transférable chez le client.
- Service analytique à RD-Biotech : ELISA, Western Blotting, cytométrie de flux, BIACORE,…
A partir des échantillons fournis par le client, RD-Biotech prend en charge l’analyse des échantillons, à partir d’une méthode validée par le client ou à partir de trousses commercialisées.
A l’issue des analyses, RD-Biotech fournit des données brutes et un rapport d’analyses au client.
Types d’analyses réalisées :
- Titration de réponses immunes par ELISA
- Typage de réponses immunes par ELISA ou Western Blotting multi pistes (système multiscreen)
- Détection de particules virales
- Dosage de marqueurs protéiques types cytokines, … dans différents types d’échantillons (plasma, surnageant de culture, fluide biologique….) par ELISA
- Caractérisation d’intéractions moléculaires (constantes cinétiques, constantes d’affinité..) par Biacore
- Dosage de molécules fonctionnelles par Biacore
- Tri cellulaire par cytométrie de flux
- …
• Autres services sur demande
Vous avez un besoin particulier et vous n’avez pas de prestataire pour la réalisation, contactez RD-Biotech, vous recevrez une réponse sous 24 à 48h. |
